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TIPOS DE MEDIO DE CULTIVO

MEDIOS QUÍMICAMENTE DEFINIDOS

Un medio químicamente definido es aquel donde su composición química exacta es conocida. Algunos ejemplos de medios químicamente definidos para el cultivo de plantas in vitro son;

Medio de cultivo de White (1934)

Este medio fue utilizado por White en 1939, en el logro que el tejido de los ápices de raíz de jitomate (Lycopersicon esculentum) se desarrollaran exitosamente en un medio liquido el cual contenía sales inorgánicas, extracto de levadura y sacarosa.

Medio B5 (Gamborg, 1970-1976)

Gamborg trabajó activamente en la elaboración de medios de cultivo para tejidos vegetales, a los que dio diferentes números para nombrarlos . EL B5 fue formulado para cultivo de callo de soja.

Macro
(NH4)2SO4	0.134 g/l
KNO3	2.528 g/l
MgSO4.7H2O	0.246 g/l
CaCl2.aq	0.15 g/l
KH2PO4	0.15 g/l
Micro
KI	0.75 mg/l
H3BO3	3.0 mg/l
MnSO4.H2O	10 mg/l
ZnSO4.7H20	2.0 mg/l
Na2MoO4.2H2O	0.25 mg/l
CuSO4.5H2O	0.025 mg/l
CoCl2.6H2O	0.025 mg/l
Na2.EDTA	37.3 mg/l
FeSO4.7H2O	27.8 mg/l

Medio Hildebrandt, Riker y Duggar (1946)

Medio utilizado para el cultivo de tejidos vegetales in vitro.

Hilderbrandt, C. C.,A.J.Riker y B. M. Duggar. 1946. The influence of the composition of the medium of growth in vitro of excised tobacco and sunflower tissue cultures. Am. J. Bpt. 33:591-597.

Otros medios de cultivo químicamente definidos:

• Heller y Miller (1958)
• Knop (1865)
• Linsmaier y Skoog (1965)
• Nitsch y Nistch (1956)
• Sachs (1890)
• Torrey y Shigemura (1957)
• Chu (1978)
• Gautheret (1942)

SUSTANCIAS NATURALES PARA EL CULTIVO IN VITRO

Muchas preparaciones de composición indefinida han sido empleadas para enriquecer los medios de cultivo; frecuentemente se han empleado con como última alternativa después de que todos los ingredientes definidos del medio han fallado en el establecimiento de cultivos de células y órganos vegetales. Ejemplos de estas preparaciones son las siguientes:

Ingredientes	Concentración
Pulpa de plátano	150 g/l
Endospermo de coco	10 a 20%
Extracto de malta	1 cu/I
Jugo de naranja	500 mg/l
Hidrolizado proteico (caseína, lactoalbúmina, peptona y triptona)	30 a 3000 mg/l
Jugo de tomate	30%
Extracto de levadura	50 a 5000 mg/l
Endospermo liquido de Zea mays	Variable
Endospermo liquido de Juglans	Variable
Jugo de pepino	Variable

Estas sustancias son por lo general termoestables. El hidrolizado proteico se emplea principalmente como fuete de aminoácidos. El jugo de naranja contribuye con el ácido cítrico, así como con otros estimulantes del crecimiento vegetal, no identificados. La pulpa de plátano y la emulsión de pescado se usan principalmente en los medios para cultivo de orquídeas, mientras que el extracto de malta y el extracto de levadura tienen un uso más general.

El trabajo con le endospermo de coco ha producido resultados sorprendentes. Si se utiliza junto con auxinas produce una fuerte división celular en los  tejidos (Steward, 1958). Kovoor (1962) vio que la leche de coco teniaunn compuesto análogo ala kinetina. Letham propuso la hipótesis de que los frutos de coco maduros contenían 9-β-D-ribofuranosilzeatina. Van Staden y drewis (1965) demostraron que contenia tanto zeatina como ribosido.

Estas mezclas deben ser evitadas en el trabajo de investigación ya que su composición es casi completamente desconocida. Por ejemplo el endospermo de coco no solo es diferente de los cocos jóvenes y viejos, sino que también puede serlo para cocos diferentes dentro de una misma edad.

BIBLIOGRAFÍA

• Pierik, R.L.M. Cultivo in vitro de plantas superiores. Editorial; mundi-prensa. Madrid, España 1989, p 326.
• Gonzales Rosas, Hector; Cruz Ramos, Alejandro. Biotecnología vegetal. CuliacanMexico 2000, p 133.
• Hurtado M, Daniel V. Cultivo de tejidos vegetales. Editorial; Trllas. 1988 México DF, p 23.